試管嬰兒的操作步驟及程式有以下幾方面:
(1)體外授精前處理及排卵監測:為了適時從卵巢採集排卵前成熟或近成熟的卵母細胞,
精確地監測排卵前卵泡成熟的進程極為重要。
利用自然月經週期采卵往往只能取到一個卵細胞。
為了增加成功的機會,
增加發育卵泡以獲得多個卵子,
現多採用有刺激週期方法(也稱促超排卵),
一次可取得3個以上的卵母細胞。
①自然月經週期中進行排卵前監測:世界上首例試管嬰兒成功就是用自然週期監測排卵期排卵的。
通過基礎體溫測定、內分泌測定(血雌二醇值、尿中黃體生成素值)和B超的監測,
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(2)采卵:在確定的時間采卵。 采卵的途徑有:①剖腹直視下穿刺卵泡取卵。 ②經腹腔鏡取卵。 ③B超引導下經腹壁、尿道膀胱或陰☆禁☆道穿刺取卵。 目前多採用經腹腔鏡或B超指引下經陰☆禁☆道取卵, 後者尤為方便。
(3)卵子培養:吸出卵泡液後, 立即尋找卵子。 取出卵細胞後, 置入裝有人工培養液的培養皿內, 並放入一定量的卵泡液, 有助於卵細胞的生長發育。 培養時間取決於所取卵泡的成熟度,
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(4)體外授精:收集精液後應用洗滌法使精液體外獲能, 然後放入裝有卵細胞的培養液內, 培養15~24小時, 在解剖顯微鏡下檢查, 如看到有兩個原核存在於卵母細胞原漿中表示已授精, 再繼續培養36~42小時。 當鏡下觀察到受精卵已分裂至4~8個細胞時, 可考慮作胚胎移植。
(5)胚胎移植:陰☆禁☆道及宮頸用生理鹽水清潔再用培養液擦洗, 將金屬或塑膠導管置入頸管內。 另一助手在顯微鏡下用1.3mm的聚四氟乙烯管從培養液內吸出胚胎細胞加吸0.03~0.05ml 培養液或0.03~0.05ml受試者血清, 將此管插入宮頸管導管內放至距宮底0.5cm處, 送胚胎入宮腔。 胚胎移植後需臥床24小時, 限制活動3~4天, 接受黃體酮治療。 移植後2周作β-GCG測定, 如無妊娠情況,